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2015年,屠呦呦因发现青蒿素治疗疟疾的新疗法获诺贝尔奖。工业上,青蒿素一般从青蒿植株中提取,产量低,价格高。基因工程及细胞工程等为培育高产青蒿植株提供了思路。科学家用紫外线处理大量青蒿幼苗后,发现一株高产植株。通过基因测序发现该高产植株中控制青蒿素合成的一种关键酶的基因发生了突变。
问题:
(1)如果用青蒿某个时期的mRNA反转录产生的双链cDNA片段进行PCR扩增,获得的cDNA与青蒿细胞中该基因碱基序列_______(填“相同”或“不同”)。(3分)
(2)将获得的突变基因导入普通青蒿之前,要先构建基因表达载体,图5、6中箭头表示相关限制酶的酶切位点。用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒,不能使用SmaⅠ切割,原因是_______。构建好的重组质粒在其目的基因前要加上特殊的启动子,启动子是_______识别结合位点。(6分)

(3)检测目的基因是否表达出相应的蛋白质,应采取_______技术。目的基因导入组织细胞后,可通过_______技术培育出青蒿幼苗。(6分)
(1)不同
(2)SmaⅠ会破坏质粒的抗性基因及外源基因中的目的基因;RNA聚合酶
(3)抗原一抗体杂交;植物组织培养
解析:
(1)mRNA反转录产生的双链cDNA中不包含原基因的内含子,与青蒿细胞中该基因碱基序列不同。
(2)由图分析可知,在质粒的抗性基因和目的基因中都有Smal识别的位点,若用该酶切割,会破坏质粒的抗性基因和目的基因。构建好的重组质粒用于转录产生mRNA,启动子是RNA聚合酶识别结合位点。
(3)基因工程中,检测目的基因是否导入受体细胞要用到DNA-DNA分子杂交技术;检测目的基因是否成功转录,要用到DNA-RNA分子杂交技术;检测目的基因是否表达出相应蛋白质,通常采用抗原一抗体杂交技术。将组织细胞培育成完整的植株幼苗采用的是植物组织培养技术,利用的原理是植物细胞的全能性。
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